流式細胞儀分選方法

對FACSAria流式細胞儀96孔微孔板單個細胞分選方法進行優(yōu)化和應用。通過對液流的調節(jié)．獲得較穩(wěn)定的分選設定值；在96孔微孔板蓋上分選肉眼可見液滴，確定分選液滴在96孔微孔板每孔相對應的蓋上的位置；分選結束后，計數(shù)單個細胞存在的細胞孔數(shù)；分選細胞培養(yǎng)7d后．記錄單個細胞存在孔數(shù)及單克隆形成的數(shù)量。結果5個細胞形成的液滴即肉眼清晰可見；96微孔板有單個細胞的孔數(shù)為80~90個，單個細胞獲得率為83．3％～93．7％，培養(yǎng)7d后，有活細胞存在的孔數(shù)為5～38孔，即單克隆形成率為6．3％～42．2％。分選前在96孔微孔板板蓋上分選肉眼可見液滴的簡單方法使得對液流位置的判斷直觀可見：流式細胞儀96孔微孔板單細胞分選是一種簡單易行，準確有效地獲得單個細胞和單克隆的方法。