教您選購多功能酶標(biāo)儀把握四大要素

一、濾片Vs光柵

多功能酶標(biāo)儀的分類方法眾多，但zui簡單的莫過于用他們的濾光方式來作分界線。一般來說，可以分為濾光片型和光柵型兩大類。但是濾片和光柵并不能同時完成同一個檢測，還是想用光柵的時候用光柵，該用濾片的時候用濾片;還有一些實(shí)驗(yàn)非用其中一個不可，另一模塊實(shí)現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起，并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。

總體來說，濾片技術(shù)由于發(fā)展已久，配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng)，可以實(shí)現(xiàn)大部分實(shí)驗(yàn)的需要。

二、雜光率&波長準(zhǔn)確性

光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流，多家廠家共同努力，已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中，zui關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的準(zhǔn)確性了。

雜光率指得就是光源通過光柵后，得到的光線中，“不需要”的波長的光占所標(biāo)稱波長的光的比例，表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性，無論使用濾光片還是光柵，雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來說，濾光片型的雜光率在10-4——10-5之間，光柵型的可以做到10-6——10-7。由于此類雜光是非特異的，而且會直接進(jìn)入zui后的檢測器，所以有多少的雜光就會引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測過程中，由于檢測器存在放大效應(yīng)，雜光率的干擾也會被指數(shù)級放大。因此，雜光率就是一個濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。

光柵的另一個重要指標(biāo)就是波長選擇的準(zhǔn)確性。因?yàn)楹芏鄼z測是依賴于物質(zhì)在某個波長的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定，實(shí)際檢測波長偏離260nm幾個nm以上的話，OD值與zui終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會發(fā)生改變。因此，一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng)，他的波長選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5——1nm之間。波長偏離過大有時就會影響到zui終結(jié)果的準(zhǔn)確性。

這兩個可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)zui關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù)，直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測量的結(jié)果，是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的zui基本要求。

三、認(rèn)證>參數(shù)

在保證檢測可靠的基礎(chǔ)上，不同儀器的下一個差異就體現(xiàn)在檢測的靈敏度上面，這時人們關(guān)心的就是儀器能夠檢測到多弱的信號。

靈敏度涉及了整個光路系統(tǒng)的設(shè)計和選料，很難說某一個部件會起決定性作用。但是有一點(diǎn)，在各種單功能檢測項(xiàng)目中，光吸收檢測用非放大型的光電二極管、熒光檢測用光電倍增管、發(fā)光檢測用專門設(shè)計的單光子計數(shù)光電倍增管，這三種不同的檢測器是各自檢測領(lǐng)域的優(yōu)先選擇。

四、比色杯+微量檢測

除了常規(guī)的6——384/1536孔酶標(biāo)板檢測之外，有些儀器還附帶了比色杯、微量檢測板等的兼容功能。無論是使用立式比色杯、臥式比色杯還是各種微量檢測板，其目的都是給光程不固定的酶標(biāo)板檢測引入一個標(biāo)準(zhǔn)光程的概念。雖然酶標(biāo)板檢測也能通過光程校正等方式實(shí)現(xiàn)10mm光程OD值的換算，但這只是一個數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換過程，檢測誤差累積較多，實(shí)際使用效果不佳。引入比色杯和微量檢測板后，光吸收的檢測光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標(biāo)準(zhǔn)長度，OD值換算更加簡單和準(zhǔn)確。附帶了此類檢測功能的酶標(biāo)儀，相當(dāng)于除了本身的多功能酶標(biāo)檢測之外，還能替代部分分光光度計的功能，使其功能更加全面，儀器的性價比更高。